產(chǎn)品名稱：illumina Truseq Chlp Library PreparationKit文庫(kù)制備試劑盒TruSeq ChlP Library Preparation Kit-Set A

產(chǎn)品貨號(hào)：IP-202-1012

產(chǎn)品說(shuō)明：

測(cè)定時(shí)間 從芯片DNA到1.5天

輸入量 5 ng芯片dna

系統(tǒng)兼容性 HiSeq 1000，HiSeq 1500，HiSeq 2000HiSeq 2500, HiSeq 3000, HiSeq 4000, 米塞克, 研究模式下的MiSeqDx, NextSeq 500, NextSeq 550

特殊樣本類型 低輸入樣本

物種類別 酵母，老鼠，果蠅，人，斑馬魚，細(xì)菌，線蟲，任何物種，老鼠，植物

技術(shù) 測(cè)序

方法 切克

核酸型 脫氧核糖核酸

產(chǎn)品介紹：

illumina Truseq Chlp Library PreparationKit文庫(kù)制備試劑盒用于Chlp來(lái)源DNA的染色質(zhì)免疫沉淀測(cè)序文庫(kù)制備。大約1.5天完成5ng DNA文庫(kù)的制備。TruSeq芯片Libary準(zhǔn)備試劑盒為從芯片衍生DNA生成染色質(zhì)免疫沉淀測(cè)序(芯片-Seq)庫(kù)提供了一種簡(jiǎn)單、成本效益高的解決方案。芯片-seq利用下一代測(cè)序(NGS)快速而有效地確定基因組中所關(guān)注的dna結(jié)合蛋白的分布和豐度。這種方法已成為zui廣泛應(yīng)用的NGS應(yīng)用之一，使研究人員能夠可靠地同時(shí)識(shí)別整個(gè)基因組中廣泛目標(biāo)的結(jié)合位點(diǎn)，具有高分辨率和無(wú)約束。

產(chǎn)品名稱：illumina IP-202-1012 文庫(kù)制備試劑盒A        產(chǎn)品貨號(hào)：IP-202-1012

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illumina  IP-202-1012  illumina Truseq Chlp Library PreparationKit文庫(kù)制備試劑盒TruSeq ChlP Library Preparation Kit-Set A

illumina  IP-202-1024  illumina Truseq Chlp Library PreparationKit文庫(kù)制備試劑盒TruSeq ChlP Library Preparation Kit-Set B

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Illumina二代測(cè)序技術(shù)，邊合成邊測(cè)序（SBS），是廣泛采用的新一代測(cè)序（NGS）技術(shù)，負(fù)責(zé)產(chǎn)生世界上90％以上的測(cè)序數(shù)據(jù)。
Illumina的二代測(cè)序技術(shù)稱為邊合成邊測(cè)序(Sequencing-by-Synthesis,簡(jiǎn)稱SBS)。SBS主要包括堿基延伸、熒光激發(fā)及信號(hào)收集、剪切等3個(gè)步驟。這3個(gè)步驟可以重復(fù)，循環(huán)進(jìn)行。每循環(huán)一次測(cè)定一個(gè)堿基。想測(cè)定多少個(gè)堿基（即讀長(zhǎng)），就循環(huán)多少次。測(cè)序循環(huán)次數(shù)可以在軟件里設(shè)定。到底測(cè)序多長(zhǎng)合適，要根據(jù)項(xiàng)目性質(zhì)和需求來(lái)決定。大多數(shù)情況下，SR實(shí)驗(yàn)（單端測(cè)序）測(cè)定1x50個(gè)堿基，PE實(shí)驗(yàn)（雙端測(cè)序）測(cè)定2x150個(gè)堿基。
1 堿基延伸
Illumina測(cè)序試劑里所使用的dNTP極ju特色，它們同時(shí)具有兩個(gè)修飾基團(tuán)：一個(gè)熒光基團(tuán)，一個(gè)可逆終止基團(tuán)。A、G、C、T 4種堿基分別標(biāo)記4種不同的熒光基團(tuán)，它們?cè)诓煌ㄩL(zhǎng)的激光激發(fā)下，能夠發(fā)射不同波長(zhǎng)（即顏色）的熒光。熒光顏色與堿基種類一一對(duì)應(yīng)，因此根據(jù)激發(fā)光的波長(zhǎng)可以識(shí)別堿基。4種堿基的終止基團(tuán)是一樣的。由于終止基團(tuán)的存在，所有dNTP每次都只能延伸1個(gè)堿基，無(wú)論給予多長(zhǎng)的反應(yīng)時(shí)間。又由于該終止基團(tuán)是可逆的，在熒光信號(hào)收集完畢之后，可以用剪切劑切除該終止基團(tuán)，使堿基恢復(fù)自然的可延伸狀態(tài)，這時(shí)即可繼續(xù)進(jìn)行下一輪循環(huán)，再測(cè)定一個(gè)堿基。
可逆終止基團(tuán)技術(shù)是Illumina二代測(cè)序的一大特色。它與橋式PCR技術(shù)一起，構(gòu)成了Illumina二代測(cè)序的兩大支柱，為穩(wěn)定獲得高質(zhì)量的測(cè)序數(shù)據(jù)打下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
2 信號(hào)采集
HiSeq系列測(cè)序儀具有紅綠兩根激光管，兩個(gè)濾色片。它們兩兩組合，可以形成4種不同的激發(fā)波長(zhǎng)，正好分別用于激發(fā)A、G、C、T 4種堿基。
Cluster上所標(biāo)記的熒光基團(tuán)在激光激發(fā)下產(chǎn)生的信號(hào)，可以用相機(jī)拍攝或者掃描的方式收集信號(hào)。掃描技術(shù)速度比較快，被X10系列采用。由于FC面積比較大，而且上表面和下表面要分別拍照，所以拍照過(guò)程相當(dāng)耗時(shí)。對(duì)于經(jīng)典的HiSeq 2000來(lái)說(shuō)，一次測(cè)序循環(huán)所產(chǎn)生的熒光信號(hào)，需要大約40分鐘的時(shí)間才能拍照收集完畢，時(shí)間比測(cè)序反應(yīng)本身還要長(zhǎng)。
3 剪切
熒光信號(hào)收集完畢后，關(guān)閉激光，用剪切劑去除測(cè)序引物的延伸產(chǎn)物上的堿基所標(biāo)記的熒光基團(tuán)和終止基團(tuán)。兩個(gè)修飾基團(tuán)均被切除，一方面消去干擾熒光，一方面使鏈末端的堿基回復(fù)到自然的可延伸狀態(tài)，為下一輪測(cè)序做好準(zhǔn)備。
再重復(fù)合成、激發(fā)、收集等步驟，即可進(jìn)行第二個(gè)堿基的測(cè)序。

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