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Paxgene血液RNA管使用方法

更新時(shí)間:2024-02-04 點(diǎn)擊次數(shù):1089


PAXgene血液RNA旨在立即穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)RNA,從而產(chǎn)生準(zhǔn)確且可重復(fù)的基因表達(dá)數(shù)據(jù)。PAXgene血液RNA管含有一種專有試劑,可在采集后立即穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)RNA。細(xì)胞內(nèi)RNA在室溫下穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)三天或在2-8°C下穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)五天。PAXgene試管可以在-20°C-70°C的溫度下冷凍,以便長(zhǎng)期儲(chǔ)存。


BD 762165 Paxgene血液RNA管使用方法:


  1.將0.2-1.5mL新鮮或解凍后的抗凝全血加入到1.5mL塑料離心管中。

  2.12,000rpm室溫離心3分鐘,棄上清(血漿)。如果此時(shí)血液細(xì)胞沉淀體積大于0.2mL,則需要減少血液的使用量,具體減少量需根據(jù)具體情況決定,因?yàn)楦鱾€(gè)個(gè)體(尤其是患者)血液中白細(xì)胞數(shù)目差別很大。

  3.將1mL溶液A加入到血液細(xì)胞沉淀中,用移液槍吹打沉淀使細(xì)胞裂解。

  4.將0.3mL的溶液B加入到離心管中,劇烈震蕩30秒。

  5.和0.2mL氯仿加入到離心管中,劇烈震蕩30秒。

  6.12,000rpm室溫離心3-5分鐘,將上清液(為無色或淺紅色,約0.5-0.9mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈離心管中。為防止污染,建議留100uL左右的上清液。下層有機(jī)相一般呈深紅色,中間層為白色,含有DNA,蛋白質(zhì)和其他細(xì)胞破碎物,避免觸及或吸取。

  7.在上清液中加入0.5mL的溶液C和0.2mL的自備氯仿,用手上下顛倒或振蕩器振蕩30秒混勻,此時(shí)溶液呈均勻的乳濁狀。振蕩器振蕩時(shí)必須使管底溶液震蕩起來。

  8.室溫12,000rpm離心3分鐘,兩相間將有白色膜狀物(蛋白質(zhì))形成。

  9.將上清液(約1mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈的1.5mL塑料離心管中,避免觸及或吸取有機(jī)相及其上面的白色膜狀物。

  10.在上清液中加入0.5倍體積的溶液D,用手上下顛倒或振蕩器振蕩30秒混勻。振蕩器振蕩時(shí)必須使管底溶液震蕩起來。


BD全血RNA管762165具有下列特點(diǎn):

       ◆ 體外診斷使用,具有CE-IVD標(biāo)志,符合歐盟98/79/EC 指令

       ◆ 整合的系統(tǒng),用于采集、穩(wěn)定和純化胞內(nèi)RNA

       ◆ 提供在分析工作進(jìn)行之前的樣本標(biāo)準(zhǔn)化處理

       ◆ 在 18~25℃下,RNA穩(wěn)定可長(zhǎng)達(dá)3天

       ◆ 在-20℃ 或 -70℃條件下至少穩(wěn)定50個(gè)月


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