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Lonza LT07-710 支原體檢測(cè)試劑盒使用指南

更新時(shí)間:2021-01-08 點(diǎn)擊次數(shù):3227

產(chǎn)品名稱:MycoAlert™ PLUS 支原體檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào): LT07-710

 

 

MycoAlert™ PLUS支原體檢測(cè)試劑盒 產(chǎn)品介紹:
MycoAlert™ PLUS Assay是一種精選生物化學(xué)檢測(cè)方法,用于檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的支原體污染問(wèn)題。支原體是一種能夠自我復(fù)制的小的原核微生物,和其他細(xì)菌不同的是它們沒(méi)有細(xì)胞壁,所以細(xì)胞形態(tài)不固定,可以有多種變化,可以在培養(yǎng)基上形成極小的菌落。支原體是寄生生物,但同時(shí)也具有腐生功能。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的污染支原體會(huì)使細(xì)胞生長(zhǎng)變慢,影響細(xì)胞活性變化。新一代MycoAlert™ PLUS Assay可以檢測(cè)出所有6種支原體屬,多達(dá)180種支原體。與MycoAlert™支原體檢測(cè)試劑盒相比有更高的靈敏度和準(zhǔn)確性。操作簡(jiǎn)單快速,只需兩步移液操作,20分鐘內(nèi)就可得出結(jié)果。適合用于檢測(cè)的樣品包括細(xì)胞上清液、未啟用培養(yǎng)基、10%-20% FCS或FBS、L-谷氨酰胺、青霉素-鏈霉素混合物、中性胰蛋白酶、慶大霉素/兩性霉素B等。

 

 

檢測(cè)原理

檢測(cè)樣品中的活性支原體裂解后,釋放出的酶與MycoAlert™ PLUS Substrate反應(yīng),催化ADP轉(zhuǎn)化為ATP。加入MycoAlert™ PLUS Reagent試劑后在熒光素酶作用下ATP產(chǎn)生光信號(hào)(ATP+ Luciferin + O2 →Oxyluciferin + AMP + PPi + CO2 + LIGHT)。光信號(hào)可用光度計(jì)讀出,根據(jù)第二次讀數(shù)(Read B)與次讀數(shù)(Read A)比率可是確定是否存在支原體污染。Read B/Read A比率<1, 支原體陰性,無(wú)支原體;1-1.2,不確定是否存在支原體,需重新檢測(cè);>1.2,支原體陽(yáng)性,存在支原體污染。

 

 

產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn):
» 生物發(fā)光技術(shù),無(wú)需DNA提取物
» 樣品檢測(cè)只需兩步移液操作,結(jié)果分析簡(jiǎn)單
» 可以和低靈敏性的板光度計(jì)或多功能讀數(shù)器配用
» 可用于檢測(cè)未啟用培養(yǎng)基,培養(yǎng)基補(bǔ)充物或水溶液
» 快速方便,標(biāo)準(zhǔn)程序20分鐘就可出結(jié)果
» 通用性強(qiáng),可檢測(cè)所有常見(jiàn)的支原體污染(不含脲原體屬)

 

 

組成成份:
• MycoAlert™ PLUS 試劑(凍干) 1 x 10 ml (LT27-286)
• MycoAlert™ PLUS 底物(凍干) 1 x 10 ml (LT27-289)
• MycoAlert™ PLUS 檢測(cè)緩沖液  1 x 20 ml (LT27-292)

 

 

支原體檢測(cè)試劑盒(MycoAlert Mycoplasma Detection Kit) 定義:支原體(mycoplasma),又稱霉形體,沒(méi)有細(xì)胞壁的原核生物,為目前發(fā)現(xiàn)的小的原核生物。支原體細(xì)胞中*可見(jiàn)的細(xì)胞器是核糖體(支原體是原核細(xì)胞,原核細(xì)胞的細(xì)胞器只有核糖體)。它對(duì)許多抗生素具有抗性,如類胸膜肺炎微生物。

一.支原體污染成為細(xì)胞培養(yǎng)的重大隱患: 

1.研究表明,世界范圍內(nèi)超過(guò)15%的培養(yǎng)細(xì)胞都有支原體污染。

2.支原體污染會(huì)對(duì)細(xì)胞造成多方面的影響,包括代謝、免疫或生化特性、生長(zhǎng)狀況、以及細(xì)胞存活等多方面的改變。

3.支原體污染會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性、可靠性和準(zhǔn)確性。

4.支原體難以檢測(cè),同時(shí)也很難消除。支原體能輕易地通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)濾膜,同時(shí)也能拮抗絕大多數(shù)的抗生素,給細(xì)胞培養(yǎng)造成巨大損失。

 

二.常規(guī)檢測(cè)才能有效避免細(xì)胞支原體污染:

1.常規(guī)性的進(jìn)行支原體檢測(cè)是保證細(xì)胞培養(yǎng)中不受到支原體污染影響的*途徑。

2.傳統(tǒng)的支原體檢測(cè)方法需要在特殊的選擇性培養(yǎng)基作用下對(duì)樣品進(jìn)行培養(yǎng),時(shí)間往往達(dá)數(shù)周,費(fèi)時(shí),費(fèi)力并且無(wú)法獲得足夠的靈敏度和特異性。

 

三、檢測(cè)原理

美國(guó)Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit支原體檢測(cè)試劑盒是利用支原體酶的這一特定活性,進(jìn)行選擇性的生物化學(xué)檢測(cè)。這些酶的存在提供了一種快速的篩選操作,能靈敏地檢測(cè)出樣本中的支原體污染。這些存活的支原體被溶解,然后釋放出來(lái)的酶與支原體檢測(cè)試劑盒中提供的底物發(fā)生催化反應(yīng),將ADP轉(zhuǎn)化成ATP。通過(guò)測(cè)量樣品中添加底物前后ATP的含量,可以得到一個(gè)比率,該比率指示支原體是否存在。如果這些酶不存在,第二次讀數(shù)相對(duì)于讀數(shù)就沒(méi)有增加;如果酶與底物進(jìn)行特異性反應(yīng),就會(huì)導(dǎo)致ATP含量上升。ATP含量的上升通過(guò)生物發(fā)光化學(xué)反應(yīng)可以檢測(cè)到,其公式如下:Luciferase ATP + Luciferin + O2 ——————> Oxyluciferin + AMP Mg 2+ + PPi + CO2 + LIGHT這個(gè)反應(yīng)的發(fā)生是在室溫(18°C~22°C)進(jìn)行的,也是熒光素酶反應(yīng)的*溫度。在支原體檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)原理中,*通過(guò)分光光度計(jì)讀數(shù),由于發(fā)出光的強(qiáng)度與ATP的濃度成線性關(guān)系,因此可檢測(cè)支原體的污染問(wèn)題。

Lonza支原體檢測(cè)試劑盒的產(chǎn)品特征Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit支原體檢測(cè)試劑盒是專門檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中是否被支原體污染的經(jīng)典試劑盒,它包含檢測(cè)所用到的各種試劑和產(chǎn)品操作手冊(cè)。該支原體檢測(cè)試劑盒具有操作簡(jiǎn)單、快速高效、結(jié)果穩(wěn)定可靠、靈敏度*等優(yōu)點(diǎn),讓您在支原體檢測(cè)時(shí)輕松容易,并確保您的培養(yǎng)潔凈無(wú)污染。

 

四.推薦Lonza(原Cambrex)公司 MycoAlert 支原體檢測(cè)試劑盒:采用發(fā)光檢測(cè),更能快速反映細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。避免支原體造成的損害,省力。

1.快速--20分鐘就可以得到結(jié)果。

2.敏感度--可檢測(cè)極少量的支原體。

3.簡(jiǎn)易--僅混合2種試劑和您的樣品,將2種讀數(shù)放到照度計(jì)上就可以得到確切結(jié)果。

4.完整--試劑盒包括檢測(cè)用所需要的全部試劑!

 

 

 

訂購(gòu)信息:

  貨號(hào)                             描述

• LT07-701 MycoAlert™ PLUS Mycoplasma Detection Kit, 10Tests
• LT07-703 MycoAlert™ PLUS Mycoplasma Detection Kit, 30Tests
• LT07-705 MycoAlert™ PLUS Mycoplasma Detection Kit, 50Tests
• LT07-710 MycoAlert™ PLUS Mycoplasma Detection Kit, 100Tests
• LT07-518 MycoAlert™ Assay Control Sets, 10Tests
• LT27-292 MycoAlert™ Assay Buffer, 20ml

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