技術(shù)文章
- 一文帶你了解qPCR原理與流程,建議收藏再看!
- 一種重組人粒細(xì)胞刺激因子的生產(chǎn)方法
- 細(xì)胞培養(yǎng)輔助試劑的檢查和觀察方法
- T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基的開發(fā)與應(yīng)用,助力免疫疾病治療新突破
- 細(xì)胞凍存液的功能及配比介紹
- 高效準(zhǔn)確:淋巴細(xì)胞分離液在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
- 優(yōu)化實驗流程:淋巴細(xì)胞分離液助力免疫細(xì)胞分析新突破
- 流式細(xì)胞術(shù)之檢測工作原理
- Corning SyntheGel基質(zhì)膠系列,升級您的iPSC細(xì)胞治療研究
- 細(xì)胞培養(yǎng)輔助試劑的基本實驗操作
細(xì)胞凍存液的原理及在使用注意事項
點擊次數(shù):1525 更新時間:2017-10-19
細(xì)胞凍存液及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以zui大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。
細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實驗順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段。在細(xì)胞建株和建系中,及時凍存原始細(xì)胞是十分重要的。在雜交瘤單克隆抗體的制備過程中,雜交瘤細(xì)胞、每次克隆化得到的亞克隆細(xì)胞的凍存保種常常是*的實驗操作。因為在沒有建立一個穩(wěn)定的細(xì)胞系或穩(wěn)定分泌抗體的細(xì)胞系的時候,細(xì)胞的培養(yǎng)過程中隨時可能因細(xì)胞的污染、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異等導(dǎo)致實驗失敗,如果沒有原始細(xì)胞的凍存,則因為上述的意外而前功盡棄。
1常用凍存液組成成分
20%血清(FBS)、10%DMSO、70%1640培養(yǎng)液;或90%血清(FBS)、10%DMSO,更可防止細(xì)胞內(nèi)冰晶形成。將DMSO和FBS加入DMEM中,各自含量占總體積的10%,然后濾膜過濾后分裝保存?zhèn)溆谩?/div>
2DMSO在凍存液中的作用
DMSO在4℃時對細(xì)胞無明顯毒性,分子量小、溶解度大、易透過細(xì)胞膜,降低細(xì)胞外未結(jié)冰溶液中溶質(zhì)濃度,使細(xì)胞免受高濃度溶質(zhì)的損傷,細(xì)胞內(nèi)水分也不會過分外滲,避免了細(xì)胞過分脫水皺縮;DMSO與水分子結(jié)合,可使冰點下降,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少冰晶損傷。
細(xì)胞凍存液注意事項
1.DMSO 不用高壓滅菌;DMEM不能高溫高壓滅菌,可以過濾除菌。
2.DMSO要用新的,而且要避光保存。
3.DMSO:含10%FBS的DMEM=1:9(體積比)。
想了解更細(xì)胞凍存液信息歡迎客服
重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司 版權(quán)所有 地址:重慶市江北區(qū)金渝大道153號8棟20-14
網(wǎng)址:m.lysqbb.cn 郵編:401122
聯(lián)系人:顏先生 電話:400-021-2200 手機(jī):15021010459 GoogleSiteMap ICP備案號:渝ICP備14000349號-4
熱賣產(chǎn)品導(dǎo)航:造血干細(xì)胞培養(yǎng)基,神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基,干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,胚胎/IPS干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,心肌細(xì)胞分化培養(yǎng)基,外周血核型分析培養(yǎng)基
聯(lián)系人:顏先生 電話:400-021-2200 手機(jī):15021010459 GoogleSiteMap ICP備案號:渝ICP備14000349號-4
熱賣產(chǎn)品導(dǎo)航:造血干細(xì)胞培養(yǎng)基,神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基,干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,胚胎/IPS干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,心肌細(xì)胞分化培養(yǎng)基,外周血核型分析培養(yǎng)基