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技術(shù)文章

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華雅干細(xì)胞為你解答細(xì)胞培養(yǎng)常見問題1、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)品極大的影響。來(lái)自不同特種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。2、欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái)，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動(dòng)物細(xì)胞，其離心速率一般為300xg（約1，000rpm），5-10分鐘，過(guò)高之轉(zhuǎn)速，將造成細(xì)胞死亡。3、冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放放37℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其...

2015 5-26
原代細(xì)胞復(fù)蘇的基本操作方法及其常用耗材介紹一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備（1）儀器：凈化工作臺(tái)、離心機(jī)、恒溫水浴箱、倒置相差顯微鏡、培養(yǎng)箱、液氮冰箱（2）玻璃器皿：吸管（彎頭、直頭）、培養(yǎng)瓶、玻璃瓶（250ml、100ml）、廢液缸（3）塑料器皿：吸頭、槍頭、膠塞、移液管（10ml）、15ml離心管、凍存管（1～2ml）（4）其他物品：微量加樣槍、紅血球計(jì)數(shù)板、記號(hào)筆、醫(yī)用橡皮膏、移液槍（5）試劑：PBS、小牛血清、培養(yǎng)液、雙抗（青霉素、鏈霉素）、胰蛋白酶（0.08%）二、操作步驟（1）從液氮容器中取出凍存管，直接浸入37℃溫水中，并...

2015 5-25
臍血中分離干細(xì)胞-改良HES分離法臍帶血干細(xì)胞改良HES分離法是將傳統(tǒng)的HES分離法進(jìn)行優(yōu)化和改進(jìn)，在后期給予氯化銨將紅細(xì)胞液的體積縮減與分離。詳細(xì)的操作步驟如下:1.確保操作時(shí)在無(wú)菌的環(huán)境下進(jìn)行，因而需要準(zhǔn)備超凈臺(tái)對(duì)穿刺部位進(jìn)行消毒；2.然后將6%的HES分別按照臍血血量的1/4加入到采集來(lái)的血袋中；3.混合均勻后使用無(wú)菌封口膠密封穿刺點(diǎn)，倒置與10℃的低溫環(huán)境中靜置6小時(shí)；4.分離好后先將臍血下層的紅細(xì)胞緩慢的放出，取50ml離心管置于其中，然后將血漿放入另一只50ml離心管中；5.把盛有紅細(xì)胞的離心管，...

2015 4-22
HES分離紅細(xì)胞HES分離紅細(xì)胞HES是從支鏈淀粉衍生出來(lái)的，是富含淀粉的復(fù)合物，其生理和化學(xué)特性主要由取代級(jí)、平均分子量決定。大量實(shí)驗(yàn)表明平均分子量越大對(duì)紅細(xì)胞的凝集作用越強(qiáng)，有效提高血細(xì)胞的沉降速度，從而使血細(xì)胞與其它細(xì)胞分離。故而，使用HES沉淀法是一種的細(xì)胞分離方法。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymalstemcells,MSCs)是指一群可向成骨細(xì)胞、成脂、肪胞、骨髓基質(zhì)細(xì)胞、肝臟細(xì)胞、心肌細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等多種細(xì)胞分化的多潛能組織干細(xì)胞,是在細(xì)胞治療、基因治療中有效發(fā)揮作用的理想工...

2015 4-22
淺談胰酶的配制方法胰酶的配制方法Hanks液是常見的平衡鹽溶液(BSS)之一。D-Hanks液則是無(wú)鈣鎂離子的Hanks液。BSS與細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)下的pH值、滲透壓及無(wú)菌狀態(tài)一致，且配方簡(jiǎn)單，是組織培養(yǎng)基本用液，常用于配制培養(yǎng)基及其他用液，或洗細(xì)胞等，細(xì)胞在BSS中可生存幾個(gè)小時(shí)。胰蛋白酶(胰酸)溶液是一種常用的細(xì)胞消化液，原代培養(yǎng)時(shí)用于處理組織塊，使細(xì)胞分離下來(lái)。傳代時(shí)用胰蛋白酶使培養(yǎng)細(xì)胞離開所貼附的培養(yǎng)瓶表面，并分散成單個(gè)細(xì)胞。胰蛋白酶主要采自?；蜇i的胰臟，呈白色粉末狀，易潮解，應(yīng)在低溫干燥...

2014 10-29
胸腺素β4在其他方面的應(yīng)用胸腺素β4在其他方面的應(yīng)用胸腺素β-4是一種胚胎在心臟發(fā)育過(guò)程中表達(dá)的蛋白，它能促進(jìn)心臟細(xì)胞的遷移并影響這些細(xì)胞的生死存亡。新研究表明這種蛋白能夠在實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)的心臟病發(fā)作后防止細(xì)胞的死亡并限制疤痕組織形成的程度。胸腺素β-4已經(jīng)被用于臨床試驗(yàn)，以促進(jìn)皮膚創(chuàng)傷的*。胸腺素β4（一種涉及正在發(fā)育的胚胎中細(xì)胞遷移和存活的蛋白）的活性所做的一項(xiàng)研究所表明的那樣。胸腺素β4增強(qiáng)組織培養(yǎng)物中胚胎及出生后心肌細(xì)胞的存活能力，在小鼠冠狀動(dòng)脈結(jié)扎后腹膜內(nèi)注射該蛋白，能成功刺激心臟修復(fù)和激活A(yù)KT...

2014 10-28
羊水細(xì)胞培養(yǎng)基的制備方式一、羊水細(xì)胞培養(yǎng)基常規(guī)培養(yǎng)法1、采樣：選擇妊娠13-14周婦女，在無(wú)菌條件下抽取羊水5ml，立即注入無(wú)菌離心管中。2、收集：離心分離細(xì)胞，1000rpm10分鐘，去上清，留0.5ml，輕打混勻。3、接種：將混勻的羊水細(xì)胞種置于50ml或100ml細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，平均10ml羊水細(xì)胞收集的細(xì)胞種置一瓶加5-10ml混合培養(yǎng)液。4、培養(yǎng)：酒精燈火先封口，靜置培養(yǎng)48小時(shí)后觀察細(xì)胞貼臂及生長(zhǎng)情況，5-10天后可見瓶底面有大量羊水細(xì)胞生長(zhǎng)。5、終止培養(yǎng)：當(dāng)有大量圓形發(fā)亮細(xì)胞出現(xiàn)時(shí)，加秋...

2014 9-22
ELISA檢測(cè)試劑盒原理及使用注意事項(xiàng)ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理ELISA檢測(cè)試劑盒應(yīng)用定性?shī)A心免疫檢測(cè)技術(shù)，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國(guó)型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段，分別來(lái)自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育，如果其中存在HEVIgM抗體，這些抗體就會(huì)與HEV的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過(guò)氧化物酶）酶結(jié)合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會(huì)與*次孵育結(jié)合上的HEV...

2014 9-19

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